血球计数板的使用方法是什么？

1 .根据待测菌悬液浓度，加入无菌水适当稀释(斜面一般稀释100倍)，以每格菌数为限。

2 .取一块干净的血细胞计数板，在计数区盖上盖玻片。

3 .摇匀菌悬液，用滴管吸取少许，从计数板中间台两侧槽沿盖玻片下缘滴加少许。 (不能过多)菌悬浮液充满液体表面张力计数的区域，避免产生气泡，用吸水纸吸取从槽中流出的多余菌悬浮液。 也可以将菌悬液直接滴加到计数区，然后在计数区两侧载物台上不粘附菌悬液，覆盖盖玻片后，上升计数区深度，以免产生泡沫。

4 .静置一段时间，使细胞沉降在计数板上，不再随液体漂移。 将血细胞计数板放在显微镜平台上稳定，先在低倍镜下找到计数区域，再切换高倍镜观察、计数。 生活细胞的折射率和水的折射率相近，观察时请减弱光的强度。

5 .计数区由16个中格组成，对角线方向计数左上、左下、右上、右下4个中格，即100格菌数。 如果是由25个中方格组成的计数区，除上述4个中方外，必须统计中央1个中方格的菌数(即80个小方格)。 计数时应统一规定沉降在格线上的细胞统计，以保证计数的准确性，避免重复计数和漏填。 菌体在大方格双线上时，为减少误差，计数时计数上线不计数下划线，计数左线不计数右线。 即，位于主线和左线上的细胞计入主线，位于主线和右线上的细胞按规定计入相应的线。 见右图：即正式计数细胞为3个。

6 .对于出芽的酵母菌，当芽体达到母细胞大小的一半时，可以作为两个菌体计算。 每个样品重复计数2-3次，每次数值不能相差很大。 否则，应该重新操作。用公式计算每1mL(g)菌悬液中含有的细胞数。

7 .测量结束后，取下玻璃罩，用水将血细胞计数板冲洗干净，不要用硬物清洗或擦拭。 请不要损伤网格刻度。 清洗后自己晒干或用吹风机晒干，放入盒内保存。