血球计数板的注意事项有哪些？

显微镜计数室。如果前期清洗不到位，或者在存放过程中有污染，或者由于操作不当造成计数室有划痕，如果不及时清洗或更换，都会对以后的计数产生很大的影响实验。因此，每次使用血细胞计数板前，都需要增加计数室的显微镜检查步骤。如果在显微检查中发现计数室脏污，则必须在进行实验前按要求进行清洗和干燥。

摇匀并服用液体。吸取培养液计数前，轻轻摇动试管，使细菌分布均匀，防止聚集沉淀，从而提高计数的代表性和准确性。

先盖上血盖，再加入菌液。菌悬液摇匀后，用血盖盖住血细胞计数板，然后用滴管吸取少许菌悬液，从计数区中间平台沿上部滴一小滴菌悬液血盖边。液体，利用液体的表面张力一次性充满计数区。如果先加菌液再盖血盖玻片，容易加太多菌液使血盖不与血细胞计数器的支撑柱接触，血盖玻片浮在菌液上方，从而导致更高的终计数。由于气泡的产生，计数会很小。

静置一会儿再数数。静置5分钟，待菌悬液不再漂浮，酵母菌全部沉降后，将血细胞计数器置于显微镜下计数。先在低倍镜下找到需要观察计数的大方块和中间方块，将中间方块移至视野中心，再将转换器移至高倍镜下进行计数。

高倍率会降低亮度。在低倍镜下，用小孔径的平面镜，可以清楚地看到血细胞计数器上的酵母。但是，换用高倍率镜头后，即使是平镜和小光圈，视野往往还是一片白茫茫，什么都看不到。这时可以尝试操作遮光装置上的金属遮光片进行遮光处理。因为活酵母和培养液的折射率相近，所以在高倍镜下视野应该变暗。

掌握计数原理。一般情况下，控制好待观察菌液的浓度，使每个小方格内有4、5个细菌细胞为宜。浓度过高可适当稀释。