血球计数板的使用方法是什么?有什么缺点?
如何使用血球计数板
在细胞计数中,为了计数快速、准确,一般选择“S”型计数通道进行计数。
如果一个方格内的细胞数量过多而无法计数,则应适当稀释样本溶液,一般每个小方格内分布有45个细胞。如果中间每个格子计数的细胞数相差20个以上,说明细胞分布不均匀,必须将样品溶液摇匀,重新计数。利用计算公式计算计数结果即可得到细胞浓度。
血球计数板的缺点
传统血球计数板上的显微计数具有很强的主观性。从样品混合-稀释-添加到计数区域、转换公式的选择、焦点调节、计数读数等,即使是按照标准化步骤进行,也会由于操作者的理解和习惯的差异而产生随机误差大,降低了计数结果的可靠性,且重复性差。使用血球计数板对细胞进行计数可以减少很多错误并缩短计数时间。根据实验,人工计数的时间通常在15分钟左右;误差为10%甚至更高。当多名科学家对同一样本进行计数时,差异甚至超过20%。牛顿光学CytoEasy单样本(五视图)测量时间为10秒,误差小于5%。